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国内外鸡的人工授精技术概况及操作技术
来源:固始土鸡孵化中心  点击量:8585

概 况
  (一)国内外人工授精技术概况
       自从1935~1939年Burrown和Quinm用按摩法成功 采到公鸡精液以后,在很长的一段时间,人工授精技术没能在鸡的繁殖上应用。其 主要原因是种鸡采用平面饲养,单间或小群自然交配,受精率高;同时由于鸡的精液保存困难,采集的精液必须在30分钟内使用完毕,输精间隔时间又短,因此,需 要劳动力多,成本高,从而使鸡的人工授精技术发展受到一定的限制。60年代以来, 现代化养禽业迅速发展,饲养管理制度改变,种鸡由原来的平养改为笼养,特别是 肉用鸡母系矮小型化,公、母鸡体重相差悬殊,自然交配困难,人工授精的优越性和迫切性日益被人们认识。许多养禽业发达国家,为了适应新的饲养管理制度,不 仅在育种中放弃单间配种方法,在祖代鸡场和父母代鸡场也改用笼养人工授精生产 种蛋。
  由于人工授精技术受到重视,许多国纷纷研究有关大规模进行人工授精的新技术, 使受精率显著提高。如美国用人工授精,受精率达96.2%。 人工授精使雏鸡成本下降10%,生产种蛋的饲料消耗降低10%~15%。
  为了进一步提高人工授精的效果,近年进行了多方面新的试验研究并取得进展。例 如:鸡的精液保存技术的新突破。 Lake,Sextan等对鸡精液在2~5℃条件下保存24小时,受精率如同新鲜精液一样。Lake(1988)在37~49℃条件保存鸡的精液试 验成功,据前苏联报道,冷冻精液已在生产中使用,受精率达85%。
  对笼养种公鸡营养需要量有许多试验报道,基本明确繁殖期种公鸡饲喂低蛋白质日 粮,有利于提高其繁殖性能和延长种用期。
  提高人工授精的工效,节省劳动力,是普及人工授精技术的重要课题之一。一方面 是研制自动的输精器,提高输精速度,如以色列研制的输精器,每小时可输750 ~900只母鸡。另一方面研究延长输精问隔时间而又获得高受精率的技术。据第7届欧 洲家禽会议报道,目前已有些国家开始研究鸡在两周不超过一次输精的技术。
  测定体外精子品质,选择优秀公鸡,是提高受精率的重要方法。 据 Wishart 等( 1985)报道,应用光扩散技术测量精子的ATP浓度和精子活力,并证实这些参数与 受精率紧密相关。1988年又提出更为简便的染色法,使用这种方法,就可以根据公鸡的体外精子来评定其本身的繁殖性能,无须作受精率试验就可以选出优秀公鸡, 提高受精率。
  仅就上述所了解到的研究成果,可以预测未来人工授精技术,在鸡的育种和繁殖上 将起更大作用。
  我国鸡的人工授精技术起于50年代。但研究和应用都比较少。真正开发这项技术是 随着我国现代化养禽发展的近20年。
  70年代末至80年代初,首先在某些教学、科研单位开展人工授精技术的研究试验, 随后在某些育种场和繁殖场开始应用,并获得了很高的受精率。如1981年大连鸡场,1983年中日友好鸡场,生产上万枚种蛋,受精率均在90%以上。这些成果,为人工 授精技术的优越性作了有力宣传。
  80年代中期到90年代初期,我国人工授精技术可以说是大面积推广应用和大发展时 期。有人曾作过估计,就我国蛋用型种鸡来说,目前可能有三分之一左右的种鸡接受人工授精,而肉用型种鸡可能不及六分之一,但这一比例在继续增加。
  (二)人工授精的优越性
  1.人工授精可以少养公鸡,即可以扩大公母鸡配种比例。自然交配配种,一只公 鸡只能配10~20只母鸡;人工授精一只公鸡可配30~50只母鸡。如一只公鸡一次采精获得0.5ml精液,精液品质好、浓度大。用0.025ml精液给母鸡输精,便可输20只母鸡。公鸡1周采精3次,可输60只母鸡,若用1:2稀释,一周便可输120只母鸡, 这样便可大大减少公鸡饲养量,节约饲料、鸡舍,降低成本。
  2.可以克服公母禽体重相差悬殊,以及不同品种间家禽杂交造成的困难,从而提 高受精率。体重相差悬殊,造成自然交配不完全,特别是火鸡,受精率低,一般只有30%~60%,采用人工授精可提高到80%~90%。肉鸡母系矮小型化,也存在公 母体重相差问题,也可使用人工授精解决配种问题。
  3.对腿部受伤或其他外伤的优秀公鸡,无法进行自然交配时,人工授精便可继续 发挥该公鸡作用。
  4.育种工作(或科学试验),使用宠养鸡人工授精,不用单间配种,是育种工作 中一大发展,它记录方便、准确,并可节省垫草。而且由于母鸡不接触地面,种蛋清洁、卫生,相应地提高孵化率。
  5.如能使用冷冻保存的精液,则不受公鸡年龄、时间、地区以及国界的限制。扩 大“基因库”,即使某优秀公鸡死后,仍可继续利用它的精液繁殖后代。

采精与输精技术
  (一)采精
  1.采精方法 采精方法有按摩法、隔截法、台鸡法和电刺激法。其中以按摩法最 适宜于生产中使用,是目前国内外采精的基本方法。除电刺激法和台禽法仍用于水禽和特种禽类,或作特殊科学试验外,其他方法很少使用。
  ①按摩采精简便、安全、可靠、采出的精液干净,技术熟练者只需数秒钟,使可采 到精液。按摩采精分腹部按摩,背部按摩,腹背结合按摩三种。
  腹背按摩通常由两人操作,一人保定公鸡,一人按摩与收集精液。
  A.保定公鸡 常用的是保定员用双手各握住公鸡一只腿,自然分开,拇指扣其翅, 使公鸡头部向后,类似自然交配姿势;第二种是用特制的采精台保定,台面垫泡沫塑料再覆盖胶布,易于清洁。保定员将公鸡置于台上,用右手握注双腿,左手握住 两翅基部;再一种方法是保定员将公鸡从笼内拖出,固定两腿并将公鸡胸部贴于宠门外,前两种方法有利于公鸡性反射,无损于公鸡胸部。后一种方法虽速度快,但 长期采用有害于公鸡健康,影响性反射,特别不宜用于肉用型公鸡。
  B.按摩与收集精液 操作者右手的中指与无名指间夹着采精杯,杯口朝外。左手 掌向下,贴于公鸡背部,从翼根轻轻推至尾羽区,按摩数次,引起公鸡性反射后,左手迅速将尾羽拨向背部,并使拇指与食指分开,跨捏于泄殖腔上缘两侧,与此同 时,有手呈虎口状紧贴于泄殖腔下缘腹部两侧,轻轻抖动触摩,当公鸡露出交配器时,左手拇指与食指作适当压挤,精液即流出,右手便可将采精杯承接精液。
  按摩采精也可一人操作,即采精员坐在凳上,将公鸡保定于两腿间,公鸡头朝左下 侧,此时便可空出两手,照上述按摩方法收集精液,此法简便、速度快,可节省劳 动力。
  C.注意事项 不粗暴对待公鸡,环境要安静。不污染精液。采精按摩时间不宜过 久,捏挤动作不应用力过大,否则引起公鸡排粪、尿,透明液增多,或损伤粘膜而出血,从而污染精液,和降低精子的密度和活力(肉用型鸡比蛋用型鸡的透明液更 多,采精时尤应注意)。采到的精液应立刻置于25~30℃水温的保温瓶内,并于采精后30分钟内使用完毕。
  ②电刺激采精 用3.4~10v交流电源,地线一端插入公鸡泄殖腔1.5~2.0cm深,火线末端点触公鸡任何一侧的股骨上端外某一部位,接触1~2秒,间歇4~5秒,如此 反复4~5次,翻出泄殖腔,便可用手挤出精液。
  2.采精前的准备
  ①公鸡的选择 公鸡经育成期多次选择之后,还应在配种前2~3周内,进行最后一 次选择,此时应特别注意选留健康,体重达标,发育良好,腹部柔软,按摩时有肛门外翻、交配器勃起等性反射的公鸡,井结合训练采精,对精液品质检查。
  ②隔离与训练 公鸡在使用前3~4周内,转入单笼饲养,便于熟悉环境和管理人员。
  在配种前2~3周内,开始训练公鸡采精,每天1次,或隔天1次,一旦训练成功,则 应坚持隔天采精。公鸡经3~4次训练,大部分公鸡都能采到精液,有些发育良好的公鸡,在采精技术熟练情况下,开始训练当天便可采到精液。但也有些公鸡虽经多 次训练仍不能建立条件反射,这样的公鸡如果属于没达到性成熟川应继续训练,加强饲养管理,反之应淘汰,此类公鸡在正常情况下约淘汰3%~5%。
  ③预防污染精液:公鸡开始训练之前,将泄殖腔外周的1cm左右的羽毛剪除。 采精 当天,公鸡须于采精前3~4小时绝食,以防排粪、尿。所有人工授精用具,应清洗、消毒、烘干。如无烘干设备,清洗干净后,用蒸溜水煮沸消毒,再用生理盐水冲洗 2~3次方可使用。
  3.采精次数 鸡的精液量和精子密度,随射精次数增多而减少,公鸡经连续射精 3~4次之后,精液中几乎找不到精子。据Mcdaniel(1977)以肉用型公鸡及来航公鸡实行不同采精次数试验,肉鸡采精次数是1天1次、l天2次和1周3次,结果是1 周采精3次的精液量和精子密度最高;来航公鸡采精次数是1周1次,l周3次和1周5次, 结果是1周采精3次,精液量较高,精子密度比1周采精5次的高,但与1周采精1次的相等。公鸡经过48小时的性休息之后,精液量和精子密度都能恢复到最好水平;休 息6天后,其精液量与每天采精1次的相等。为确保获得优质的精液以及完满地完成整个繁殖期的配种任务;建议采用隔日采精 制度。若配种任务大,也可以在1周之内连续采精3~5天,休息2天,但应注意公鸡的营养状况及体重变化。使用连续采精最好从公鸡30周龄以后。
  (二)输精
  1.输精操作 输精母鸡必须先进行白痢检疫,凡阳性者一律淘汰,同时还须选择 无泄殖腔炎症,中等营养体况的母鸡,产蛋率达70%时,开始输精, 更为理想。输精时两人操作,助手用左手握母鸡的双翅,提起,令母鸡头朝上,肛门朝下,右 手掌置于母鸡耻骨下,在腹部<柔软处施以一定压力, 泄殖腔内的输卵管开口便翻 出。输精员便可将输精器,向输精管口正中轻轻插入输精。
  笼养母鸡人工工精,不必从笼中取出母鸡,只需助手的左手握住母鸡双腿,稍稍提 起,将母鸡胸部靠在笼门口处,右手在腹部施以压力,输卵管开口外露、输精员便 可注入精液。
  输精注意①当给母鸡腹部施以压力时,一定要着力于腹部左侧,因输卵管开口在泄 殖腔左侧上方,右侧为直肠开口,如着力相反,便引起母鸡排粪;②无论使用何种输精器,均须对准输卵管开口中央,轻轻插入,切忌将输精器斜插入输卵管,否则, 不但不能输进精液,而已容易损伤输卵管壁;③助手与输精员密切配合,当输精器插入的一瞬间,助手应立刻解除对母鸡腹部的压力,输精员便有效地将精液全部输 入;①注意不要输入空气或气泡;⑤防止相互感染,应使一次性的输精器,切实做到一只母鸡换一套输精器,如使用滴管类的输精器,必须每输1 只母鸡用消毒绵花 擦拭输精器。
  2.输精部位和深度 不同部位或不同深度输精,对受精率均有影响。原因是输精 部位不同,精子到达受精部位的数量与时间有差异。如阴道输精(特别是当子宫有硬壳蛋或输卵管内有蛋),精子则先进入子宫阴道的贮精腺内。子宫或膨大部输精, 全部精子(包括死、弱精子)可到达受精部位,而且只需15分钟,因此,刚输入的精子,可与产蛋后所排出的卵及时受精(专见精子在输卵管移行)。
子宫、膨大部输精,多用于研究或冷冻精液。这两部位输精后,都有较长的持续受 精时间,但胚胎早期死亡较多。
  膨大部输精,需要外科手术,子宫输精则要通过长达8~10cm的阴道“V”形弯曲, 而且又是强的括约肌,所以,从阴道插到子宫输精的技术较难掌握,同时这种方法对输卵管有很大的刺激,容易引起在子宫内的蛋早产,使卵巢和输卵管的机能受到 干扰,停产若干时间。
  阴道输精,输精器插入1~2cm为阴道始端输精(浅输精),4~5cm为中阴道输精, 6~8cm为深阴道输精。Wentaorih(1975)对火鸡和鸡作2cm和7cm输精, 结果火鸡的受精率和受精持续均以前者高,而母鸡则无差异。Burke(1969 )在母鸡产蛋后 作中阴道和深阴道输精,前者输精后产的第一枚蛋均为无精蛋,后者则有44%的受精率,子宫有硬壳蛋时输精,中阴道输精的受精率为87%,深阴道为80%。长期实 行深度输精,由于生殖道的生物学机能遭到破坏,使受精率、孵化率下降,甚至产蛋中断。根据公鸡生殖器官解剖分析,在自然交配中,退化交配器官突入阴道,大 约是在1~2cm的始端。所以在生产中应采用浅阴道输精,更符合自然状态,而且输精速度快,受精率高,由于品种、体型的差异,推荐浅输精,轻型蛋鸡以1~2cm, 中型蛋鸡和肉甲型鸡以2~3cm为宜。但在母鸡产蛋率下降,精液品质较差的情况下,可用中阴道输精。
  3.输精量与输精次数 输精量与输精次数,取决于精液品质和持续受精时间的长 短。根据精子在输卵管存活时间,及母鸡受精规律的观察,母鸡须在1周之内, 输入一定数量的优质精液,才可获得理想受精率。但由于品种、个体、年龄、季节之 间的差异,不能长期以固定剂量、固定间隔时间输精,否则不能持续获得高的受精率。所以,应按上述因素调整输精量。
  精液中的透明液因品种、个体有很大的差异,所以精子密度变化范围也很大。一般 肉用型鸡精液中透明液量大于蛋用型鸡,因此输精量就应有所不同。
由于母鸡年龄增长繁殖生理发生变化(如蛋重增加、蛋壳质量变差),使输卵管内 环境改变,精子在改变了的环境中,其存活也发生一定影响;若以相同剂量的精液给青年母鸡和产蛋末期母鸡输精,一般是前者持续受精的天数比后者长。因此,对 老龄母鸡输入的精子数要比青年母鸡多,而且输精的问隔时间也要缩短。
  公鸡的繁殖力下降,常常是在母鸡繁殖力下降同时发生。精液品质差(精子活力低, 畸形率高),受精率、孵化率均不理想,因此,必须以较高的绝对精子数来补偿。 VanWenbeke(1979)认为,鸡的精液在2~5℃保存6~24小时,需要输入2亿精子, 才能获得高受精率。冷冻精液需输入0.1ml解冻精液,才能相当于0.03ml 新鲜精液 的效果。
  输精量和输入精子数也不是越多越好,因为贮精腺对精子的容量是有限的。输入过 多的精子不能进入贮精腺内,而滞留在输卵管腔,输卵管腔对于长期滞留的精子则是一个不利的环境。所以,除输入一定量的精液外,还应正确确定两次输精的最佳 时距,才能维持高受精率。
  在大规模人工授精中的良好经济效益,是以一定的输精量,既可延长输精间隔时间,而又保持高受精率。根据我们的实践,建议每次给母鸡输入70*10(6)~100X10(6)个优质精子;蛋用型母鸡盛产期,每次输入原精液0.025ml,每5~7天输一次; 产蛋中、末期以0.05ml原精液,每4~5天输一次;肉用型母鸡每次输入0.03ml原精液,每4~5天输一次,中、末期以0.05~0.06m1,每周输2次,或4天输一次。
  如用稀释或保存精液输精,应根据稀释倍数和保存结果调整输精量。母鸡首次输精 应输入2倍的输精量,或每只母鸡连输两天,以确保受精所需精子数,提高受精率。
  4.输精时间 一天之内,用同样剂量精液在不同时间输精,受精率有明显差异, 主要是子宫内有硬壳蛋,以及产蛋使输卵管内环境出现暂时异常,从而影响精子在输卵管中存活与运行。在一天之内,于光照开始4~5小时母鸡产蛋与排卵最为集中, 此时输精受精率一般低于下午输精,而且容易引起母鸡内产卵而造成腹腔炎。
  美国Auburn大学(1978)报道,肉用型种鸡于每天21时输精,受精率最高。Parker(1978)认为午后当母鸡子宫有软壳蛋输精,受精率最高,而子宫有硬壳蛋,在其 产出前4小时或产出后、小时输精,均出现低受精率。 1980 年北京农业大学的试验,证实,母鸡子宫有硬壳蛋时输精,对受精率有影响,而且硬壳蛋越接近临产时 输精,受精率越低,在输精后2小时内,母鸡产蛋(即产蛋前2小时内输精),其一周种蛋的受精率仅为62.3%,输精后4小时以上产蛋,受精率为92.1%。
  建议输精时间选择在一天内大部分母鸡产蛋后,或母鸡产蛋前4小时,产蛋后3小时 以后输精。具体时间安排应按当时光照制度而定。通常在16~17点输精。
精液品质评定有关精液评定近年有许多新技术,如精子活力的各种染色剂,用以鉴别死活精子数。
  密度评定除用分光光度计外,使用离心法测定,速度快而准确;Chaudhuri(1988) 研究用无色四唑染料,根据比色测定精子的氧化还原能力,从而估计其受精率,准 确率很高。但目前在生产中更多使用的还是常规评定方法。

精液常规检查项目
  (一)外观检查 正常精液为乳白色,不透明液体。混入血液为粉红色;被粪便污 染为黄褐色;尿酸盐混入时,呈粉白色棉絮状块;过量的透明液混入,则见有水渍 状;凡受污染的精液,品质均急剧下降,受精率不高。
  (二)精液量的检查 可用具有刻度的吸管、结核菌素注射器或其他度量器,将精 液吸入,然后读数。
  (三)活力检查 于采精后20~30分钟内进行,取精液及生理盐水各一滴,置于载 玻片一端,混匀,放上盖玻片,精液不宜过多,以布满载玻片、盖玻片的空隙,而 又不溢出为宜。在37℃条件,用200~400倍显微镜检查。按下面三种活动方式估计 评定:直线前进运动,有受精能力,占其中比例多少评为0.1至0.8,0.9级;圆 周运动、摆动两种方式均无受精能力,活力高,密度大的精液,在显微镜下可见精 子呈旋涡翻滚状态。
  (四)密度检查
  1.血细胞计数法:用血细胞计数板来计算精子数较为准确。先用红细胞吸管,吸 取精液至0.5处,再吸入3%的氯化钠溶液至101处,即为稀释200倍。摇匀, 排出吸管前的空气,然后将吸管尖端放在计数板与盖玻片间的边缘。使吸管的精液流入 计算室内。在显微镜下计数精子(见图515),计5个方格的精子总数。5 个方格应选位于一条对角线上或四个角各取一方格,再加中央一方格。计算时只数精子头部 3/4或全部在方格中的精子(见图5一16)。最后按下公式,算出每毫升精液的精子数。例:5个方格中共计350个精子,即350÷100=3.5X10亿/ml。计算结果1ml精 液精子数为35亿。
  2.精子密度估测法:
  ①密的 显微镜下,可见整个视野布满精子,精子间距离几乎无空隙。鸡每毫升精 液约有精子40亿以上,鹅6~10亿以上,火鸡80亿以上。
  ②中等密度 在一个视野中,精子之间距离明显。鸡每毫升精液有20~40亿精子; 鹅3~6亿,火鸡50~80亿。
  ③稀的 精子间有很大空隙。鸡每毫升精液有精子20亿以下,鹅3亿以下,火鸡 50 亿以下。
  (五)pH值检查 使用精密试纸或酸度计,便可测出。
  (六)畸形率检查 取精液一滴于玻片上,抹片,自然干燥后,用 95%酒精固定1 ~2分冲洗,再用0.5%龙胆紫(或红、蓝墨水)染3分钟,冲洗,干后即在显微镜下检查,数300~500个精子中有多少个畸形精子。

精液稀释与保存
  (一)精液稀释
  1.精液稀释的目的 ①鸡精液量少,密度大,稀释后可增加输精母鸡数,提高公 鸡的利用率;②精液经稀释可使精子均匀分布,保证每个输精剂量有足够精子数;
  ③便于输精操作;④稀释液主要是给精子提供能量,保障精细胞的渗透平衡和离子 平衡,提供缓冲剂,防止pH变化,延长精子寿命有利于保存。
  2.稀释液的配制 配制稀释液应严格按操作规程。①化学药剂应为化学纯或分析 纯。使用新鲜的pH呈中性的蒸馏水或离子水;②一切用具均应彻底洗涤干净、消毒,烘干;③准确称量各种药物,充分溶解后,过滤、密封消毒(隔水煮沸或蒸气消毒 30分钟)加热须缓慢,防止容器破裂及水分丢失;④按要求调整pH值和渗透压,扩量用的稀释液pH值可在6-8。
  7-4,用于保存的稀释液,则应以较低的pH值,渗透压以360~400mosmolkgH2OH20为宜;⑤短期保存的稀释液中所用醣类,奶类和鸡蛋,除作为营养剂外,还是有防止 精子发生“冷休克”作用。所以应取鲜奶煮沸,去奶皮;取鲜蛋,消毒蛋壳,抽取纯净卵黄,上两种物质应侍稀释液冷却后加入,⑤加入抗生素等生物制剂,亦应在 稀释液冷却后加入。
  3.稀释方法与稀释比例 采精后应尽快稀释, 将精液和稀释液分别装于试管中, 井同时放人30℃保温瓶或恒温箱内,使精液和稀释液的温度相等或接近,避免两者温度过大,造成突然降温,影响精子活力。稀释时稀释液应沿装有精液的试管壁缓 慢加入,轻轻转动,使均匀混合。作高倍稀释应分次进行,防止突然过激改变精子 所处的环境。
  精液稀释的比例,根据精液品质和稀释液的质量而定。精液经过适当稀释有利于体 外保存,如果室温(18~22℃)保存不超过1小时,稀释比例以l:1~ 2为宜。在0 ~5℃保存3、8或24~48小时,稀释比例宜l:3~4。冷冻精液,稀释比例常在 1:4 ~5,或更高。但太高稀释比例,难于保证输入精子数,尤其作阴道输精,输精量 若超过0.4m1,输入的精液就可能倒流于泄殖腔内。
  4.稀释液配方介绍。见表5-5
  (二)精液保存
  1.常温保存 新鲜精液常用隔水降温,在18~20℃范围内,保存不超1小时用于输 精,可使用简单的无缓冲的稀释液如A液。目前我国常用的是生理盐水(0.9 %氯化钠)或复方生理盐水用者更接近于血浆的电解质成分,稀释效果更好些。稀释比 例为1:1。
  2.低温保存 鲜无污染精液经稀释后,在0~5℃条件下短期保存, 使精子处于休 眠状态,降低代谢率,从而达到保存精子活力和受精能力。
低温保存方法是在适宜的稀释液稀释之后,降温的速度要缓慢。可以将30℃的稀释 精液,先置于30℃水溶中,再放入调到2~5℃的电冰箱中。如无电冰箱,可将装有稀释精液的试管,包以1cm厚的棉花,再放入塑料袋内或烧杯内。 而后直接放入装 有冰块的广口保温瓶中。这样便可达到逐渐降温的目的。
  精液若在0~5℃,保存5~24小时,则应使用缓冲溶液来稀释,稀释比例可按 1:1~2,甚至1:4~6。稀释液的pH最宜在6.8~7.1。据目前报道低温保存所用稀释液如表5-5的D,G的Lake液、C的SexTon液、E的苏联C-2液和H的BPSE液;输精后收集 2~8天的种蛋受精率都超过90%。
  低温保存方法还有:6oTOMO∧AOB(1973)提出的在精液稀释后,保存前使氧饱和的 通氧保存法, Wishart(1981)在精液中通空气法;以及在精液中增加气压等,都 能获得较高受精率。
  3.精液冷冻保存①鸡冷冻精液的现状和意义 鸡的冷冻精液保存技术,自Shaffner l941年用。6℃ 冷冻30秒的精液输精获得第一只小鸡; 1949 Potge第一个成功利用防冻剂(甘 油),冷冻鸡的精液。到目前已有40~50年历史,在这期间人们进行了许多研究,如冷冻后精子形态和结构的变化;防冻剂选择,冷冻速度,冷冻后精液的输精量和 输精部位等等,都有许多报道,所以目前鸡的冷冻技术已有很大进展。但受精率的试验结果却很不一致,故冷冻精液迄今为止还没作为实用性技术广泛应用。但据报 道,前苏联已实际应用鸡的冷冻精液技术。
鸡的冷冻精液如能实际应用,无论是在经济上或育种上都很有意义;利用冷冻精液 可以加快育种进度;可以防止优秀公鸡因病或意外事故死亡而失去种用价值;可以   建立巨大的具有优良性状的基因库,以及保存品种资源等。
  ②鸡精液冷冻程序 冷冻程序一般如下:A。采精:精液必须为无粪便、无透明液污 染。B。稀释:稀释后降温平衡,也可在稀释液中加防冻剂后,降温, 平衡一次进行;C。降温:通常在5℃条件,置放若干时间;D。加防冻剂:不同试验, 使用防 冻剂量不一致,如甘油一般用4%~10%, DMSO(二甲亚砜)4%~6%, 乙烯二醇6%~12%;E。平衡:即加入防冻剂对精液作用时间,一般在5℃条件下15 分钟 ~2小时。F,冷冻速度:一是快速细管内冻结法,将稀释好的精液装入塑料细管, 封口后在液氮蒸气中预冻,再将细管投入液氮中。二是颗粒快速冻结法,在于冰上 钻孔,将精液滴在冰孔中冻结后,投入液氮保存。也有用氟板、铜纱网或铝盒、在液氮蒸气上滴冻。三是两步冻结法,用可控温致冷器冻结,先是以每分钟降温1℃, 一直降到-20℃或-30℃为止,然后急剧降温(或在3分钟内降到150℃),再投入液氮保存;6。分装:有细管、安瓿、颗粒;H。解冻:“常在0~5℃左右或30~40℃ 的水浴中解冻;L.输精:常用子宫输精。阴道输精应先用离心方法除去甘油, 阴道输精深度应以3~4cm为宜。
  4.前苏联精液冷冻情况根据中国农业科学院畜牧研究所1990 年访苏报告:前苏联 的冷冻精液已用于商品化种鸡场生产。鸡的冷冻精液受精率最高为98%、鹅和鸭在 90%以上,重型和轻型火鸡分别80%和90%。 1989年曾用300只公鸡,制备50L的 冷冻精粒,运往远离列宁格勒1400km以外,给1万只母鸡输精,孵化10万枚种蛋。 气温高时受精率为70%,气温凉爽时为85%。该技术已在育种场和种鸡场推广使用。
  精液保存两年受精率仅下降1%~2%。其冷冻程序如下:①用按摩方法采精,精液 无污染,先将精液放入15~20℃的集精杯内;②采精后10分钟内,在室温下将0 . 5ml精液注入青霉素瓶内,然后加入0.5ml稀释液;③盖好青霉素瓶,放在2~8 ℃ 平衡40~60分钟;④吸取适量防冻剂加入经过平衡的稀释精液中,盖好盖,摇匀, 然后按水平方向固定在晶体低温恒温器小室内(-80℃ )的圆形固定器上; ⑤以 12~13转/分钟速度使青霉素瓶旋转,精液就均匀冻贴于瓶壁上。③取出青霉素瓶, 立即放入液氮速冻,取出再放入液氮罐内保存。
  另一方法为颗粒速冻;将已加防冻剂稀释好的精液,吸入注射器,直接注入液氮槽 内,速冻成颗粒,将颗粒取出放入液氮罐内保存。
  解冻时,在40~60℃水浴锅中溶解,检查活力。输精量为0.2m1,阴道输精,深度 为3~4cm,初次输精连续输2天,以后每3天输一次。
  根据1984 H.H.ПОЛНЦЕБ等介绍,稀释液为AKC-1,其成分为果糖0.8g,谷氨酸钠1.92g,无水醋酸钾0.5g,聚乙烯吡咯烷酮0.3g,硫酸鱼精蛋白0.032g,蒸馏水100m1;或是HPTKΦ液见表5-5。防冻剂是用0.08mIN-二甲基酰胺,或是用8% 的二甲亚砜。
  (5)鸡冷冻精液存在的问题:鸡精液冷冻技术在实用化方面,还有一些问题。 据 1986年日本的山本洋一等认为,冷冻精液受精率存在的问题,可能与操作技术的熟练程度、控温的精确程度以及卫生等有关。
今后试验虽仍是以颗粒法和快速细管冻结法为主,但要研究两步降温的最适的冻结 条件。
  就稀释液来说,以Lake稀释液的冷冻效果最好,但还没找到对受精作用无害的防冻 剂,以及除去甘油的良好操作工艺。
  种公鸡的饲养管理种公鸡的饲养管理,是保证人工授精顺利进行的重要条件。因为人工授精的关键技 术是要获得优质的精液,所以种公鸡的饲养管理应该和母鸡一样受到重视。应该从育成期开始就有计划地培育。
  近年由于人工授精技术普遍开展,特别是肉用种鸡也采用人工授精,公鸡的饲养管 理就更为突出,因此国内外对公鸡的饲养、营养以及选择培育成了热点,在这方面目前有许多研究报道,但还没有一个完善的公鸡营养标准,所以,种公鸡的饲养管 理更应重视参考各育种公司的饲养手册。
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