国家三类新兽药—黄芪多糖口服液抗鸡传染性法氏囊病的临床试验

摘要  目的：考察黄芪多糖口服液对SPF鸡感染传染性法氏囊病病毒的抑制效果。方法：以IBDV强毒株BC-6/85人工感染28日龄SPF鸡，于攻毒前后在其饮水中加入不同剂量的黄芪多糖口服液，观察试验鸡的临床症状、病理变化、病变发生率等。结果：0.67‰（V/V）的黄芪多糖口服液通过饮水给药，对IBDV强毒株BC-6/85攻击具有保护作用，其可极显著提高其法氏囊指数和胸腺指数，可用于传染性法氏囊病的预防。0.33‰（V/V）、0.67‰（V/V）、1.33‰（V/V） 3种不同浓度的黄芪多糖口服液经饮水给药，可有效抑制人工感染传染性法氏囊病。各给药组与攻毒对照组比较，均能显著提高其法氏囊指数，高、中剂量治疗组效果极显著，而中剂量治疗组与高剂量治疗组比较，无显著性差异。推荐黄芪多糖口服液防治鸡传染性法氏囊病的剂量为0.67‰（V/V），以饮水给药，连续服用5d。

关键词  黄芪多糖口服液；人工感染；鸡传染性法氏囊病；抑制

鸡传染性法氏囊病（IBD）是由传染性法氏囊病病毒所引起的一种感染雏鸡和幼鸡的急性接触性传染病^[1、2]。其基本特征^[3]是对法氏囊内Ｂ淋巴细胞损伤，鸡体免疫能力受到抑制，鸡对其它传染病易感性增强，以及对其它禽类疫苗免疫应答能力下降，而造成养禽业极大的经济损失。近年来由于变异株和超强毒的不断出现^[4、5、6]，免疫失败时有发生，给IBD的防制带来了极大的困难。

黄芪多糖口服液由中药黄芪提取加工制成，具有补气、固表、利尿的作用，且能诱导机体产生干扰素，促进抗体产生，增强吞噬细胞活性，调节机体免疫功能。对于动物病毒性传染病具有较好的治疗和预防作用。为了观察黄芪多糖口服液对SPF鸡感染传染性法氏囊病病毒的抑制效果，本试验采用IBDV强毒株BC-6/85人工感染28日龄SPF鸡致其发病，于攻毒前后在其饮水中加入不同剂量的黄芪多糖口服液，观察该药物对SPF鸡感染传染性法氏囊病病毒的抑制效果。

1　材料与方法

1.1  材料

1.1.1  黄芪多糖口服液，由北京生泰尔集团爱迪森（北京）生物科技有限公司生产，批号：070526；成分：黄芪；规格：100ml/瓶。

1.1.2  鸡传染性法氏囊病病毒  IBDV强毒株BC-6/85，毒力为10^-5/0.1ml  3/3法氏囊阳性，购自中国兽药监察所，冻干日期： 1997年6月25日。

1.1.3　试验动物  25日龄SPF鸡，共240只，购自北京梅里亚维通实验动物技术有限公司。

1.1.4  饲料及饲养  SPF鸡饲料，购自北京科澳协力饲料有限公司。试验鸡均饲养在标准鸡舍，自由采食与饮水。

1.2  方法

1.2.1  毒株处理  将IBDV强毒株BC-6/85按照菌种分发证书上的毒力用灭菌生理盐水稀释，以1000BID（BID:法氏囊感染剂量）进行攻毒。

1.2.2   实验动物分组与处理  

将供试鸡随机分为6组，每组40只。自由采食与饮水。分组与给药情况（见表1）。

于攻毒12h后每组剖检1只鸡，共剖检6只，观察到有2只鸡出现法氏囊轻微发黄等病变，此时即开始给药。

表1  攻毒和给药方案

注：1.33‰（V/V）以1ml黄芪多糖口服液兑水 0.75kg;  0.67‰（V/V）以1ml黄芪多糖口服液兑水 1.5kg; 

    0.33‰（V/V）以1ml黄芪多糖口服液兑水 3.0kg

1.2.3  观察指标 

攻毒后第3d将各组实验鸡每组取5只剖杀，分别采集法氏囊观察病理变化，计算病变发生率^[7、8]。

    攻毒后第14d将所有实验鸡称重、剖杀，观察病理变化，分别采集法氏囊观察病理变化，计算病变发生率；将采集的法氏囊、脾脏、胸腺称重，计算法氏囊等免疫器官指数。

2　结果

2.1  发病情况、临床症状与病理变化

攻毒3d后，开始表现轻微临床症状。健康对照组，精神、饮食欲均正常；预防组，精神、饮食欲基本正常；高剂量组，有1只鸡精神沉郁、活动减少，饮食欲减损；中剂量组，精神、饮食欲均正常，无异常反应；低剂量组，有个别鸡粪便白色带血，精神、饮食欲基本正常；攻毒对照组，发现有相当一部分鸡粪呈白色、灰绿色或带血，有1只鸡死亡，死亡鸡剖检，法氏囊严重发黄、有胶冻样渗出物、剖开后内部呈豆腐渣样、有大量粘液和出血点（见表2、3）。

表2    攻毒后试验鸡临床表现

表3    攻毒后第3d法氏囊眼观病理变化

    通过攻毒后第3d的临床症状和病理变化上分析，预防组鸡只出现病理变化的数量少，且病变程度轻于各给药组和攻毒对照组。

2.2  给药后病变情况 

攻毒后第14d剖检病理变化（见表4、图1）。

表4  攻毒后第14d法氏囊眼观病理变化

2.3  免疫器官指数^[9]

脾脏指数、胸腺指数计算方法同法氏囊指数（见表5）。

                表5  各实验组免疫器官指数差异性比较( ±S)                 

注: aa表示与健康对照组之间比较P＜0.01,差异极显著；a表示与健康对照组之间比较P＜0.05,差异显著；

bb表示与攻毒对照组之间比较P＜0.01,差异极显著；b表示与攻毒对照组之间比较P＜0.05,差异显著。

法氏囊指数,中剂量治疗组与低剂量治疗组之间比较P＜0.01，差异极显著；高剂量治疗组与中剂量治疗组之间比较P＞0.05，无显著性差异；预防组与高剂量治疗组之间比较P＞0.05, 无显著性差异。

脾脏指数,中剂量治疗组与低剂量治疗组之间比较P＜0.05，差异显著；高剂量治疗组与中剂量治疗组之间比较P＞0.05，无显著性差异；预防组与高剂量治疗组之间比较P＞0.05，无显著性差异。

胸腺指数,中剂量治疗组与低剂量治疗组之间比较P＜0.05，差异显著；高剂量治疗组与中剂量治疗组之间比较P＜0.05，差异显著；预防组与高剂量治疗组之间比较P＜0.01，差异极显著。

3  讨论

    试验表明，黄芪多糖口服液对IBDV强毒株BC-6/85攻击鸡具有一定的保护作用，攻毒后预防组鸡只出现病理变化的数量少，且病变程度轻于各给药组和攻毒对照组。表明黄芪多糖口服液可用于传染性法氏囊病的预防。

各给药组均能使攻毒后的法氏囊病变程度减轻，且随着剂量的升高法氏囊出现病变的鸡只数减少。表明黄芪多糖口服液可用于传染性法氏囊病的临床治疗。

此病毒的主要感染器官是法氏囊，因此法氏囊的病变具有代表性，病变的程度也易掌握^[10]。从法氏囊指数上分析，各给药组与攻毒对照组比较，均能显著提高其法氏囊指数，高、中剂量治疗组效果极显著，而中剂量治疗组与高剂量治疗组比较，无显著性差异。建议在治疗传染性法氏囊病时，使用中浓度0.67‰（V/V）的黄芪多糖口服液。

从脾脏指数上分析, 攻毒对照组的脾脏指数极显著高于健康对照组，攻毒后法氏囊出现明显的肿大；而预防组和各给药组明显改善了攻毒后脾脏肿大的现象，使脾脏指数与攻毒对照组比较有显著的差异。

本实验证明，黄芪多糖能提高鸡的免疫功能，对传染性法氏囊病的防治有积极的意义，这与文献报道^{[11、12、13]}的黄芪多糖具有抗病毒和提高机体免疫功能的作用一致。

4  结论

4.1  通过攻毒后的病理变化、病变发生率和临床症状上分析，可以证实本试验人工感染传染性法氏囊病的病理模型制造成功。

4.2  0.67‰（V/V）黄芪多糖口服液通过饮水给药，对IBDV强毒株BC-6/85攻击具有保护作用，其可极显著提高其法氏囊指数和胸腺指数，可用于传染性法氏囊病的预防。

4.3  0.33‰（V/V）、0.67‰（V/V）、1.33‰（V/V） 3种不同浓度的黄芪多糖口服液经饮水给药，可有效治疗人工感染性传染性法氏囊病。各给药组与攻毒对照组比较，均能显著提高其法氏囊指数，高、中剂量治疗组效果极显著，而中剂量治疗组与高剂量治疗组比较，无显著性差异。推荐黄芪多糖口服液治疗传染性法氏囊病的剂量为0.67‰（V/V），以饮水给药，连续服用5d。

主要参考文献

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